簡要描述:外周血單個核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是指外周血中具有單個細(xì)胞核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞等。人外周血單個核細(xì)胞 Human PBMC
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品牌 | IPHASE | 貨號 | 082A01.11/082A01.12 |
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規(guī)格 | 5million | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 免疫調(diào)節(jié),分選T細(xì)胞,B細(xì)胞 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥 |
人外周血單個核細(xì)胞 Human PBMC
外周血單個核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)是指外周血中具有單個細(xì)胞核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞等。
提取方法:
全血樣本聚蔗糖-泛影葡胺(Ficoll-Hypaque)密度梯度離心分離
其他種屬PBMC
猴外周血單個核細(xì)胞 Monkey PBMC
大鼠外周血單個核細(xì)胞 Rat PBMC
小鼠外周血單個核細(xì)胞 Mouse PBMC
比格犬外周血單個核細(xì)胞 Dog PBMC
豬外周血單個核細(xì)胞 Minipig PBMC
兔外周血單個核細(xì)胞 Rabbit PBMC
外周血單個核細(xì)胞(Peripheral Blood Mononuclear Cell,PBMC),是指外周血中具有單個核的細(xì)胞,包括淋巴細(xì)胞(Lymphocyte)、單核細(xì)胞(Monocyte)、樹突狀細(xì)胞(DC)和其他少量細(xì)胞。PBMC可利用健康人或動物供體的外周血,通過Ficoll密度梯度離心,磁珠分選等步驟獲得,主要包括淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。
Ficoll是蔗糖的多聚體,中性,平均分子量400,000,當(dāng)密度為1.2g/mL,未超出正常生理性滲透壓,也不穿過生物膜。紅細(xì)胞、粒細(xì)胞比重大,離心后沉于管底;淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的比重小于或等于分層液比重,離心后漂浮于分層液的液面上,也可有少部分細(xì)胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細(xì)胞,就可從外周血中分離到單個核細(xì)胞。
人外周血單個核細(xì)胞 Human PBMC
不同細(xì)胞類型的比例
PBMC中大部分都是淋巴細(xì)胞,包括B細(xì)胞和T細(xì)胞,其中CD3 T細(xì)胞又占了淋巴細(xì)胞中絕大部分(45-70%)。這些T細(xì)胞都處于初始(naive)狀態(tài),即已經(jīng)成熟了但沒有受到抗原刺激。 在正常人中,只有非常小的一部分初始T細(xì)胞會因抗原識別而被激活。同樣的B細(xì)胞也都處于初始狀態(tài)。相對于淋巴細(xì)胞,單核細(xì)胞的比例在10-30%,收到刺激之后會發(fā)育成樹突狀細(xì)胞(DC)或巨噬細(xì)胞。干細(xì)胞的比例非常低,只有0.1-0.2%,因此很難從全血樣本中分離到。
細(xì)胞運(yùn)輸與保存
(1)干冰運(yùn)輸,收到細(xì)胞后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;
(2)T25瓶運(yùn)輸細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存,具體操作步驟見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
PBMC收到后注意事項:
(1)收到PBMC細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時反饋。
(2)先不打開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放培養(yǎng)箱靜置四小時,穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),切忌在溫箱內(nèi)靜置過夜。
(3)靜置后鏡檢,拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)。建議傳代后也拍照記錄細(xì)胞生長情況。
(4)貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,收集細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,留8ml繼續(xù)培養(yǎng)至80%左右再傳代,瓶蓋可稍微擰松。
(5)細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基含血清和雙抗,可收集后4℃保存?zhèn)溆?,可補(bǔ)加2%血清。剛開始傳代時建議一半用細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基,一半用自備的培養(yǎng)基,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件,以免因不適應(yīng)而造成生長狀態(tài)不佳。
(6)細(xì)胞胰酶消化液建議使用PBS配制。
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